Original YGNF 有机合成 2023-10-25 21:00
正相硅胶柱层析，上样分为湿法上样和干法上样。湿法上样虽然方便，但是如果样品不是液体，要预先用小极性溶剂溶解，可能会影响分离效果，很多样品则无法溶解，此方法应用范围受到很大限制。干法上样，即硅胶吸附法，则适用于大部分情况（硅胶是酸性的，对酸敏感的化合物不适合此方法）。因此硅胶拌样是实验室中必备的操作技能，但是你真的会拌样吗？拌样为什么拌干很重要？拌样如果没有完全旋干大极性溶剂，则会严重影响柱层析的分离度！残留的大极性溶剂相当于提高了最开始洗脱溶剂的极性。极端情况下，对于一些小极性的产物，如果残留较多的大极性溶剂，样品会直接会冲下来，白忙一场。另外即使残留少量的溶剂也会明显影响色带的平整度，如果有Rf值相近的杂质，则无法完全分开。下面小编介绍一下拌样的标准操作：首先，在圆底烧瓶中将混合物溶解在二氯甲烷中，二氯甲烷是最优选择，如果单纯二氯甲烷无法溶解可以考虑加入少量乙酸乙酯或甲醇促溶。加入硅胶（硅胶的质量大约是化合物质量的两倍，硅胶密度0.5左右，可以粗略量体积来确定量）。在旋转蒸发仪上浓缩该溶液。（注意：硅胶是非常细的粉末，很容易被吸入旋转蒸发仪中。用脱脂棉塞住防溅球进行拌样，但不要太紧）。当硅胶成均匀的流沙样，且没有气体冒出时，说明固体已经干燥，从旋转蒸发仪上卸下烧瓶，再用真空泵将溶剂完全抽尽（注意：脱脂棉塞住抽气头，防止硅胶吸入油泵）。当硅胶再没有气泡产生时，从真空系统中取下烧瓶，用干净的刮刀从壁上刮下固体。 进行上样。如果拌样后，发现有结块，说明硅胶的量可能不够，可以重新加入溶剂溶解后，再补加硅胶重新拌样。如果硅胶加入的量是足够的（两倍质量），但是拌样硅胶还是有结块，说明样品中有高沸点溶剂没有除去，如1,4-二氧六环，单纯的1,4-二氧六环可以用水泵旋掉，但是样品中残留的1,4-二氧六环被硅胶吸附，则单纯用水泵很难完全旋干。这种情况可以考虑把旋转蒸发仪的水泵换成油泵进行拌样。
